小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞，在適當(dāng)?shù)臈l件下，骨髓間充質(zhì)干細胞可以分化為三個胚層來源的組織細胞而進行細胞移植的治療，在體外培養(yǎng)擴增后也可種植在生物材料上，回植入機體修復(fù)組織損傷。
充質(zhì)干細胞在治療組織器官退行性疾病，遺傳缺陷性疾病和基因治療方面也展現(xiàn)了美好的前景，本產(chǎn)品具有良好的增殖和分化潛能，可分化為成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞等，采用干冰保存運輸。收到細胞時，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
方法步驟：
1、沿著脊髓切開，從身體的軀干解剖后肢，小心不要損傷股骨；
2、進一步解剖后肢，通過切開膝關(guān)節(jié)來切開每個后肢；從脛骨和股骨中去除肌肉和結(jié)締組織；將骨干刮干凈；
3、超凈臺操作，切斷骨髓腔末端下方的脛骨和股骨的末端；將裝有完整培養(yǎng)基的10 ml注射器上的27號針頭插入通過移除生長板暴露的海綿狀骨中，用1ml*培養(yǎng)基將骨髓塞從骨頭切開的末端沖洗出來，收集在冰上的10ml管中。
4、小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞通過70mm過濾網(wǎng)過濾細胞懸液，以去除任何骨針或肌肉和細胞團塊； 通過臺盼藍排除法測定細胞的產(chǎn)量和活力，并在血細胞計數(shù)器上計數(shù)。
5、在95mm培養(yǎng)皿中培養(yǎng)BM細胞，在1ml*培養(yǎng)基中，密度為25×106個/mL細胞（基于步驟4中獲得的細胞計數(shù)）；3h后更換新的*培養(yǎng)基。
6、再培養(yǎng)8小時后，用1.5ml新鮮的*培養(yǎng)基替換培養(yǎng)基；此后，每8小時重復(fù)該步驟，直至72小時的初始培養(yǎng)。
更新時間：2021-07-24
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